技术服务
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病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术通过携带目标基因片段的重组病毒载体侵染植物,触发RNA干扰机制,特异性降解内源基因mRNA实现转录后基因沉默,该技术无需建立稳定遗传转化体系,适用于木薯、林木等遗传操作困难的物种。与传统的基因功能分析方法相比,VIGS能够在侵染植物当代对目标基因进行沉默和功能分析,且具有沉默单个或多个基因家族成员的潜力。目前,烟草脆裂病毒(TRV)构建的VIGS体系是目前应用最为广泛的系统。由pTRV2质粒及其伴随质粒pTRV1组成。
1、可瞬时干扰目的基因表达;
2、适用于无稳定遗传转化体系物种;
1、本司具有多个物种组织培养条件和瞬时转化技术;
2、本司可代为观察和记录干扰后植物表型;
3、本司可进行相关的基因表达量和各生理指标检测。
咨询下单—样本寄送—VIGS注射—表型观察和生理指标检测—结果交付。
标准实验报告,包括实验步骤与结果;
组织VIGS注射后表型观察图;
VIGS基因和目的基因表达量的检测图;
生理指标检测结果。
植物组织需要活体寄送,或者寄送种子由本司代为种植;
载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml,冰袋运输;
质粒 DNA 体积大于20 μl,浓度不低于30ng/μl,,且主带明显无降解;
提供测序结果以及抗性;
如需我司构建载体,要求详见载体构建。

结果初析:对甜瓜TPS基因进行干扰并对果实进行低温检处理和表型观察,结果显示TPS基因表达量降低引起果实不耐低温。荧光定量检测显示目的基因表达量明显降低,相关抗逆基因表达量也有不同程度的上下调。对海藻糖(THL), 海藻糖-6-磷酸合酶(TPS), 海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)活性进行测定,显示这些抗逆酶类活性明显下降。