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技术服务

技术简介

病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencingVIGS)技术通过携带目标基因片段的重组病毒载体侵染植物,触发RNA干扰机制,特异性降解内源基因mRNA实现转录后基因沉默,该技术无需建立稳定遗传转化体系,适用于木薯、林木等遗传操作困难的物种与传统的基因功能分析方法相比,VIGS能够在侵染植物当代对目标基因进行沉默和功能分析且具有沉默单个或多个基因家族成员的潜力。目前,烟草脆裂病毒(TRV)构建的VIGS体系是目前应用最为广泛的系统。由pTRV2质粒及其伴随质粒pTRV1组成。

应用范围

1、瞬时干扰目的基因表达;

2、适用于无稳定遗传转化体系物种;

公司优势

1、本司具有多个物种组织培养条件和瞬时转化技术

2、本司可代为观察和记录干扰后植物表型

3、本司可进行相关的基因表达量和各生理指标检测

服务流程

咨询下单—样本寄送—VIGS注射—表型观察和生理指标检测—结果交付。

结果交付

标准实验报告,包括实验步骤与结果;

组织VIGS注射后表型观察图;

VIGS基因和目的基因表达量的检测图;

生理指标检测结果

送样要求

植物组织需要活体寄送,或者寄送种子由本司代为种植;

载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml,冰袋运输;

质粒 DNA 体积大于20 μl,浓度不低于30ng/μl,,且主带明显无降解;

提供测序结果以及抗性;

如需我司构建载体,要求详见载体构建。

本司服务案例(以甜瓜为例

28,VIGS抗寒.jpg

结果初析:对甜瓜TPS基因进行干扰并对果实进行低温检处理和表型观察,结果显示TPS基因表达量降低引起果实不耐低温。荧光定量检测显示目的基因表达量明显降低,相关抗逆基因表达量也有不同程度的上下调。对海藻糖(THL), 海藻糖-6-磷酸合酶(TPS), 海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)活性进行测定,显示这些抗逆酶类活性明显下降。

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