技术简介：

泛素为包含76个氨基酸，大小约为8.6 kDa的蛋白质，将泛素添加到底物蛋白质的过程称为蛋白质泛素化。泛素化是一种动态的翻译后修饰，涉及活化，结合和连接三个步骤，分别由泛素激活酶（E1），泛素偶联酶酶（E2s）和泛素连接酶（E3s）催化。大致流程为：泛素被泛素激活酶(E1)结合并与ATP反应，形成泛素-AMP复合物。然后，泛素会从泛素-AMP复合物中转移至泛素结合酶(E2)上。泛素结合酶(E2)将泛素从自身转移到特定的底物泛素连接酶(E3)上。每种底物蛋白质都有对应的泛素连接酶，它们能够与特定的底物相互作用。泛素连接酶(E3)将泛素与底物蛋白质结合，形成泛素化的底物蛋白质。泛素连接可以发生在底物蛋白质的特定氨基酸残基上，最常见的是在底物蛋白质的赖氨酸残基上形成泛素链。

应用范围：

1、体内检测蛋白泛素化；

2、体外检测蛋白泛素化。

公司优势：

1、使用含促融标签的蛋白表达载体，确保表达出可溶性蛋白；

2、多种提取方案保证顺利提取植物活性蛋白；

服务流程：

咨询下单—实验信息确认—蛋白表达—泛素化检测—结果交付。

结果交付：

标准实验报告，包括实验步骤与结果；

蛋白表达考染图和WB检测图、泛素化检测图。

送样要求：

如提供蛋白：纯化蛋白各100ul，浓度大于0.5mg/ml，WB检测图；

体内实验组织样本需要干冰寄送，且质量不少于10g；

告知蛋白标签/特异性抗体信息，特异抗体提供10ul以上，浓度大于0.5mg/ml；

载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml，冰袋运输；

质粒 DNA 体积大于20 μl，浓度不低于30ng/μl,，且主带明显无降解；

提供测序结果以及抗性；

如需我司构建载体，要求详见载体构建。

本司服务案例（以GST标签蛋白为例）：

结果初析：GST抗体检测结果：混合样本有WB条带说明S-RNase蛋白原核表达成功。Actin抗体检测结果：混合样本中有WB条带说明花粉活性总蛋白提取成功。Ubiquitin抗体检测结果：反应后的S-RNase蛋白WB检测有明显的泛素化条带，说明花粉总蛋白可以使得S-RNase蛋白发生泛素化。同时，在花粉萌发和花粉管生长过程中，S-RNase蛋白发生泛素化程度更高。